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實(shí)現超靈敏診斷的改良ELISA法的新進(jìn)展
數字化ELISA
數字ELISA是大約10年前作為一種超靈敏的檢測技術(shù)發(fā)展起來(lái)的。當在毫微微升大小的微孔陣列中實(shí)現酶反應時(shí),在非常低的目標濃度下可以檢測到累積的產(chǎn)物,從而實(shí)現單分子檢測。利用ELISA檢測到甲型流感病毒重組核蛋白的毫微摩爾濃度。應用帶有膠體金的雙功能熒光磁性納米球(AuNPs)建立了檢測Q流感病毒的ELISA。該方法的檢出限為7.8fg/mL。已經(jīng)被描述為數字化ELISA。
Akama及其同事開(kāi)發(fā)了一種由數字ELISA修改的高靈敏度檢測方法,該方法沒(méi)有清洗和信號擴增,他們稱(chēng)之為數字均勻非酶免疫吸附試驗。該方法檢測到前列腺特異性抗原的含量為0.093 pg/mL,而商業(yè)化的高靈敏ELISA檢測到0.84pg/mL,數字化ELISA檢測到0.055 pg/mL。