血清的保存應該注意以下幾點(diǎn):
(1)需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月,由于血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽选?br/>(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多,而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量,補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進(jìn)淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀。
(4)一般廠(chǎng)商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌,如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清。
(5)血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點(diǎn)"。經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀(guān)察象"小黑點(diǎn)",常誤認為血清受污染,一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì )影響細胞生長(cháng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì )變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì )破壞而影響血清質(zhì)量。