發(fā)布時(shí)間: 2022-09-20 點(diǎn)擊次數: 380次
小鼠蛋白ELISA試劑盒按其說(shuō)明使用時(shí)可準確測量的范圍.被檢樣品的含量超出測定線(xiàn)性范圍,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測定才能得到準確結果.試劑盒的測定線(xiàn)性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個(gè)指標,也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一.
小鼠蛋白ELISA試劑盒的準確度:通常以回收率定值血清的靶值范圍,對照試驗及干擾試驗的結果來(lái)分析判斷:
1.非特異性與干擾試驗 對維生素C 黃疸 溶血 乳糜等因素的耐受程度,干擾值越小越好.
2.對照試驗 將被檢試劑盒與*的參考方法同時(shí)測定若干樣本,計算兩組結果的相關(guān)系數和直線(xiàn)回歸方程.
3.回收試驗 回收率越接近全部,準確率越高.
4.定值血清的測定 對于某些無(wú)法準確加入標準物的試劑盒,可用低 中 高濃度的定值血清進(jìn)行測定,測得值符合定值血清的靶值范圍為合格。
小鼠蛋白ELISA試劑盒操作進(jìn)程的控制:
1、嚴格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作.按說(shuō)明進(jìn)程嚴峻控制操作時(shí)間,避免孵育時(shí)間人為延伸,導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗*。
3、封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴,避免陽(yáng)性標本的液體蒸發(fā),發(fā)作周邊現象然后導致“花板”的出現。
4、用洗板機洗板時(shí),保證洗液注滿(mǎn)各孔,elisa試劑盒洗板針疏通,洗完板后在吸水紙挑選潔凈無(wú)或少塵的吸水材料上輕輕拍干:還要避免針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的進(jìn)程中易發(fā)作拖帶現象而導致“花板”的出現。
5、合理安排檢測量,避免反應板過(guò)多構成洗板等候時(shí)間長(cháng)。
6、加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。
7、顯色劑盡量在臨用前制作,堅持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時(shí)保持顯色劑不外流;AB液應避免觸摸金屬器械,加停止液時(shí)應避免發(fā)作氣泡。
9、小鼠蛋白ELISA試劑盒應保證C清潔,整個(gè)操作進(jìn)程中保證酶標板不觸摸次氯酸,以上的辦法可以使“花板”降至至低極限。然后提高檢測的特異性,并得到更可靠的實(shí)驗成果。