ELISA試劑盒實(shí)驗操作技巧您知多少？

　　ELISA試劑盒在國內有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等；ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測，自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內生化領(lǐng)域的長(cháng)足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結果判斷較客觀(guān)等因素，已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗質(zhì)量，我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗的成功，那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎？

　　ELISA試劑盒的17種操作技巧，如若您掌握了這些實(shí)驗技巧之后，在做ELISA實(shí)驗中，試驗起來(lái)會(huì )更熟練，大大的降低了實(shí)驗過(guò)程中的風(fēng)險，ELISA試劑盒實(shí)驗的入門(mén)新手掌握了這些知識后，操作起來(lái)都會(huì )快的多。

　　ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下：

　　1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

　　2.合理安排檢測量，以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。

　　3.在吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

　　4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

　　5.樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。

　　6.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。

　　7.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。

　　8.ELISA試劑盒實(shí)驗中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(cháng)，導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?，難以清洗。

　　9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

　　10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

　　11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。

　　12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

　　13.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。

　　14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。

　　15.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。

　　16.吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

　　17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。