成功的實(shí)驗是個(gè)循序漸進(jìn)的過(guò)程影響EL ISA實(shí)驗結果的因素有很多只有的掌握了實(shí)驗的細節才能購做出好的實(shí)驗。 您可知您的ELISA試劑盒實(shí)驗為什么會(huì )失敗?下面酶聯(lián)生物帶大家了解一下。
一、標本的影響
溶血標本及混有紅細胞的血清采用E1 ISA法檢測易產(chǎn)生假陽(yáng)性??赡苁侨苎逯泻羞^(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)在洗滌過(guò)程中往往難以洗脫它可使H202釋放出原生態(tài)氧 (0)從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)即顯藍色產(chǎn)生假陽(yáng)性。所以嚴重溶血標本禁用。
二、標本受細菌污染
因菌體中可能含有內源性辣根過(guò)氧化物酶因此 被細菌污染的標本同溶血標本樣 亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結果。
三、標本保存不擋
在冰箱中保存過(guò)久的標本在間接法ELISA測定中會(huì )導致本底過(guò)深 造成假陽(yáng)性;為克服 上述干擾ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定5d內測定的血清標本可存放于4°C,1周后測定的血清標本應低溫凍存 ;凍存后融解的標本 蛋白質(zhì)局部濃縮分布不均 應充分混合后再測定但混勻時(shí)應輕柔不可強烈振蕩。
四、標本凝固不全
在工作中有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測 常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強行離心分離血清使血清中仍殘留部分纖維蛋白原 在EL ISA測定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊易造成假陽(yáng)性結果 ;因此血波標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
廣州奧瑞達生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)生物科學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗儀器、研究試劑和實(shí)驗室耗材,致力于向國內外生物科學(xué)研究人員提供服務(wù)。專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)廠(chǎng)家具有先進(jìn)水平的產(chǎn)品推薦給各類(lèi)研究人員;另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開(kāi)發(fā),推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視,更多地側重于科研的投入。
以上是奧瑞達生物帶您了解ELISA試劑盒實(shí)驗失敗的原因,您了解了嗎?