大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽 （ELISA）試劑盒

主要設(shè)備

試劑

(1) 包被緩沖液（pH9.60.05M 碳酸鹽緩沖液）：

Na2CO3 1.59g

碳酸氫鈉 2.93g

加入蒸餾水至 1000ml

（2）洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M

K2PO4 0.2g

Na2HPO4 12H2O 2.9g

氯化鈉 8.0g 0.2g

Tween-20 0.05% 0.5ml

加入蒸餾水至 1000ml

(3) 稀釋劑：

牛血清白蛋白 (BSA) 0.1 克

加入洗滌緩沖液至 100ml

或用山羊血清、兔血清等血清和洗滌液補足5-10%。

(4) 終止液（3M H2SO4）：

滴加蒸餾水178.3ml、濃硫酸（98%）21.7ml。

(5)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸)：

0.2MNa2HPO4 (28.4g/L) 25.7ml

0.1M檸檬酸（19.2g/L）24.3ml

加入 50ml 蒸餾水。

(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)溶液：

TMB（10mg/5ml 無水乙醇）0.5ml

底物緩沖液 (PH5.5) 10ml

0.7%H2O2 32μl

(7 ABTS使用液：

ABTS 0.5mg

底物緩沖液 (PH5.5) 1ml

3%H2O2 2μl

(8)抗原、抗體和酶標抗體。

(9)正常人血清和陽性對照血清。

利用

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固定化和抗原或抗體的酶標記。固相載體表面結(jié)合的抗原或抗體仍保留其免疫活性，而酶標抗原或抗體同時保留其免疫活性和酶活性。在測量過程中，測試樣品（其中的抗體或抗原）與固體支持物表面的抗原或抗體發(fā)生反應(yīng)。在固相載體上形成的抗原抗體復合物通過洗滌與液體中的其他物質(zhì)分離。然后加入酶標抗原或抗體，也通過反應(yīng)與固相載體結(jié)合。此時，固相上酶的量與樣品中被測物質(zhì)的量成正比。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的多少與樣品中被測物質(zhì)的多少直接相關(guān)，因此可以進行定性或定量分析根據(jù)顏色深度。由于酶的高催化效率，間接放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，并且該測定方法達到了高靈敏度。 ELISA 可用于測量抗原和抗體。

組成結(jié)構(gòu)

1. 血清：手術(shù)過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。采血后，通過以 1000 x g 離心 10 分鐘快速小心地分離紅細胞。

2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。通過以 1000 x g 離心 30 分鐘去除顆粒。

3. 細胞上清液：1000×g 離心 10 分鐘以去除顆粒和聚集物。

4、組織勻漿：加入適量生理鹽水搗碎組織。 1000 × g 離心 10 分鐘，取上清液。

5、儲存：樣品如不立即使用，應(yīng)分成小份儲存于-70℃，避免反復冷凍。盡量不要使用溶血或高脂血癥。如果血清中含有大量顆粒，請在測試前將其離心或過濾。不要在 37°C 或更高的溫度下解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻、充分地解凍。

該IBL試劑盒可用于小鼠血清、EDTA血漿和細胞上清液中白細胞介素6的定量檢測

同產(chǎn)品展示：